مناقشة رسالة طالب الماجستير مصطفى رياض عبدالله من قسم علوم الحياة

جرت يوم الاحد الموافق 20/1 / 2019  على  قاعة المرحوم الدكتور  فهد علي الجبوري  المناقشة العلنية لرسالة طالب الماجستير مصطفى رياض عبدالله عبد اللطيف   الموسومة :

دراسة مناعية لعينة من مرضى اللاهودجكن العراقيين

حيث تألفت لجنة المناقشة من التدريسيين الأفاضل :

أ.م.د.زهراء حسين محمد قدوري           رئيسا

أ.م.د.نجوى احمد شهاب                       عضوا

أ.م.د.وفاء صبري ماهود                        عضوا

ا.م.د.حازمة موسى خليل                     عضوا ومشرفا

ا.م.د.مجيد ارشيد صباح                       عضوا ومشرفا

 

وتم في هذه الدراسة ،جمع  56 عينة 37 للمرضى الذين يعانون من سرطان الغدد الليمفاوية اللا هودجكين و 19 عينة لنسيج الغدد اللمفاوية الطبيعية التي تم استخدامها كسيطرة ، وقد جمعت العينات من المختبرات التعليمية ومستشفى الشهيد غازي الحريري في مدينة الطب / بغداد ومن بعض المختبرات الخاصة للفترة مابين 2016 و 2018. شخصت عينات المرضى من قبل اطباء متخصصين بالطرق التقليدية التي تشمل ، المعلمات السرطانية والأعراض السريرية. وقد تضمنت العينات 20 رجلاً و 17 امرأة تتراوح أعمارهم بين 20 و 72 سنة. جمعت عينات المرضى المكتشف المرض لديهم حديثا اي لم يتعرضو لعلاج كيميائي او اي علاج اخر. تضمنت الدراسة جانبين الجانب الكيميائي النسيجي المناعي باستخدام عدة الصبغة وجانب جزيئي باستخدام تقنية البلمره الجزيئيه المتعدده باستخدام نظام BIOMED-2  و تقنية Heteroduplex للكشف عن نسيلة الجين للسلسلة الثقيله للجسم المضاد  في مرضى اللاهودجكن وتم استخراج الحمض النووي من الانسجة المثبته بالقوالب الشمعية. وشخصت نتائج الدراسه الكيميائية المناعية النسيجية بصبغات ايجابية لبروتين β-catenin في السيتوبلازم كما تم الكشف عن تصبيغ النقطي من β-catenin في الخلايا السرطانية في 30 من اصل 37 (30/37) بنسبة (80 ٪) في حالات سرطان الغدد الليمفاوية الا هودجكين و كانت النتائج السلبية لبروتين β-catenin  7 من اصل 37 (7/37) بنسبة (20 ٪) ، في حين الانسجه اللمفاوية الطبيعية اظهرت 4/19 بنسبة (21 ٪)  وجود تلطيخ موجب خارج المركز جرثومي في العقد اللمفاوية وفي جميع حالات الأنسجة اللمفاوية العادية أظهرت تلطيخ إيجابي في المركز جرثومي. وقد لوحظ β-catenin النووي في 7/37 (18٪) حالة ليمفوما اللاهودجكين ، في حين لم يظهر أي تلطيخ إيجابي في انوية الأنسجة اللمفاوية الطبيعية. وقد لوحظت الميتادهرين (MTDH)  بصفة موجبه في 24/37 (64 ٪)  في حالة سرطان الغدد الليمفاوية اللا الهودجكن ، في حين 13/37 (36 ٪) اظهرت نتيجة سلبية ل MTDH ، بينما في الأنسجة اللمفاوية العادية 15/19 (79 ٪) اظهرت حالة سلبية ل MTDH و 4 / 19 (21 ٪) من الحالات أظهرت تلطيخ إيجابي ل MTDH في اللمفاويات. اما نتائج الدراسة الجزيئية فقد تم الكشف عن النسيلة الإيجابية بنسبة 70٪ (26/37) كأحادي النسيلة بينما 29٪ (11/37) أظهرت كنمط متعدد النسيلة.  اما عن طريقة استخلاص الحامض النووي من القوالب النسيجية الشمعية فكانت طريقه Promega هي الامثل في الحصول على حامض نووي متكامل . كما ان استخدام نظام  BIOMED-2 لتحليل النسيله في إعادة ترتيب الجينات لجزيئة IGH   (framework I, II, III)  كطريقة مثلى في تشخيص الانماط الثانوية لانواع اللا هودجكن. ومن الذي ذكر سابقا نستطيع ان نستنج شيئان, اولا ان MTDH يمكن ان يعتبر عامل مهم في علاج اللاهودجكن, ثانيا استخدام جين IGH كاداه جيده في تشخيص مرض اللاهودجكن اللمفاوي.

---

MSc. Thesis discussion of student Mustafa Riadh Abdulla from department of Biology

On Sunday ,the 2th of January 2019,at the hall of the late Dr.Fahad Ali Al-Juboori , MSc. Thesis discussion of student Mustafa Riadh Abdulla from department of Biology entitled (Immunological Study on Iraqi patients with Non-Hodgkin’s lymphoma)has been discussed

The discussion committee

Asst.prof.Dr.Zahra’a Hussein Mohammed Qaudoori  Head

Asst.prof.Dr.Najwa Ahmed Shihab   member

Asst.prof.Dr.Wafa’a Sabri Mahood   member

Asst.prof.Dr.Hazima Moosa Khalil    supervisor –member

Asst. prof. Dr.Majeed Arsheed Sabah    supervisor –member

the study was included, 56 samples, 37 from patients with non-Hodgkin’s lymphoma (NHL) and 19 from normal lymphoid tissue that were used as control. The samples were collected from the educational laboratories and the Martyr Ghazi Al-Hariri Hospital in Baghdad Medical City and from some private laboratories between   2016 to 2018. All patients were diagnosed by pathologists according to conventional methods that involved cancer parameters and clinical symptoms. Samples were included 20 men and 17 women ages at a rate of 20 to 72 years. Patients were early detected (without treatment with chemotherapy or any drug).This study had included two part the histological study which carried out by using immun ohistochimstry technique, and molecular study which carried out by using European biomedicine (BIOMED-2) multiplex PCR and heteroduplex technique for clonality detection of Immunoglobulin heavy chain (IGH) in NHL and DNA extracted from formalin fixed paraffin-embedded (FFPE) tissue. The results of immune histochimstry was revealed positive staining in cytoplasmic as a perinuclear of β -catenin in tumor cell that was detected in 30/37 (80%) case of non Hodgkin’s lymphoma and 7/37(20%) that was negative for b-catenin, while 4/19 (21%) case of normal lymphoid tissue were showing a positive staining outside the germinal center and in all case of normal lymphoid tissue showed the positive staining in germinal center. Nuclear β -catenin was observed in 7/37 (18%) cases of non-hodgkin’s lymphoma, while no positive staining in nuclear was shown in normal lymphoid tissue.  Metadherin (MTDH) was detected as a positive in 24/37 (64%) cases non hodgkin’s lymphoma, while 13/37 (36%) cases were detected as a negative for MTDH.In normal lymphoid tissue, 15/19 (79%) of cases also detected as a negative for MTDH and 4/19(21%) of case was showed positive staining for MTDH in lymphocytes. In molecular study the positive clonality was detected in rate about 70% (26/37) as a monoclonal while 29% (11/37) showed a polyclonal pattern. In a group with Diffuse large B-cell lymphoma(DLBCL) clonality was observed in 66%(10/15) as monoclonal. In small lymphocytic lymphoma(SLL),the monoclonality that was detected in 75%(3/4). In Burkitt lymphoma (BL) monoclonality was shown in 66 %(2/3). In mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma (MALT)type mono clonality was shown in 50%(1/2) and in patients diagnosed with follicular Lymphoma(FL) and nodal marginal zone lymphoma(NMZL)showed 100% of case as a monoclonal pattern. In normal lymphoid tissue 100 %(19/19) the clonality showed a polyclonal pattern. In conclusion, the nuclear β-catenin pathway may suggest as a therapeutic target for DLBCL and SLL. MTDH expression in NHL cells can be enhanced cell proliferation, which leads to inhibition the apoptosis of cells .MTDH was over expressed in NHL with nuclear Wnt/β -catenin expression, and­ confirmed that MTDH worked as an oncogene to promote lymphoma cells proliferation and inhibit their apoptosis through wingless-type(Wnt) β-catenin signal pathway. The best kit was used in this study for DNA extraction from FFPE tissue was promega kit for total DNA. The procedure of a BIOMED-2 was used as a best way to clonality analysis of IGH gene rearrangements (framework I, II, III) in the diagnosis of NHL. According to above this study can conclude two main things. The first, metadherin may considered as an important therapeutic target for NHL and the second, the IGH may considered a good molecules to detect the sub types of NHL