ناقش قسم علوم الحياة في كلية التربية للعلوم الصرفة (ابن الهيثم) بجامعة بغداد رسالة الماجستير الموسومة ( دراسة جزيئية لبكتريا Pseudomonas aeruginosa المقاومة للامبنيم المعزولة من عينات سريرية مختلفة ) للطالبة (مروه لفتة جبر) التي التي تم انجازها باشراف (م.د. محمود ابراهيم اسماعيل ) ونوقشت على قاعة (المرحوم أ. سالم عبد الحميد).
وتضمنت الدراسة جمع 160 عينة سريرية تضمنت: الحروق (72) عينة والجروح (25) عينة والبلغم (18) عينة وخمج المسالك البولية (24) عينة والتهاب الأذن الوسطى (21) عينة من مستشفيات مدينة بغداد للفترة من 19/12/2017-24/4/2018 حيث زرعت العينات السريرية على وسط آكار الماكونكي لعزل بكتريا الزائفة الزنجارية .
وأظهرت نتائج البحث أن معدل عزل الزائفة الزنجارية كان 65% (104/160) من المجموع الكلي للعينات السريرية وأن 37.5% (39/104) من عزلات الزائفة الزنحارية مقاومة للأمبينيم .
اما فيما يخص الكشف المظهري phenotype عن أنزيمات البيتالاكتاميز فقد اظهرت النتائج أن جميع عزلات الزائفة الزنجارية المقاومة للأمبينيم (39/39) غير منتجة لأنزيمات البيتالاكتاميز واسعة الطيف بطريقة القرص المزدوج التأزري ، بينما وجد أن نسبة 89.7% (35/39) من العزلات البكتيرية أنتجت أنزيمات البيتالاكتاميز المعدنية بطريقة أضافة محلول EDTA إلى قرص الأمبينيم.
اما نتائج فحص الحساسية للمضادات الحيوية تجاه 11 مضادا بطريقة أنتشار القرص فقد ظهر أن جميع عزلات الزائفة الزنجارية المقاومة للأمبينيم IRPA والمنتجة لأنزيمات البيتالاكتاميز المعدنية 100% (35/35) حساسة للبوليمكسين ب (المقاومة 0%) وأمتلكت معدل مقاومة عالية للمضادات الحيوية الأخرى: 100% للسيفوتاكسيم cefotaxime والسفتازيديم ceftazidime (الحساسية 0%) و 94.3% لنيتلميسين netilmicin والأميكاسين amikacin و 91.4% للميروبينيم meropenem والجنتاميسين gentamicin والتوبراميسين tobramycin و88.6% السيفيبيمcefepime و 82.9% الأزترونيم aztreonam و77.1% الببراسلين/تازوبكتم . و تبين من خلال نتائج تحديد التركيز المثبط الأدنى MIC أن عزلات الزوائف الزنجارية المقاومة للأمبنيم والمنتجة أنزيمات البيتالاكتاميز المعدنية مقاومة 100% للسيفازولين cefazolin والتيجسيكلينtigecycline و أن قيم التركيز المثبط الأدنى لهما ≤ 64 أو ≤8 ميكروغرام/مل على الترتيب.
أظهر الكشف الجزيئي عن الجينين blaIMP و blaVIM والمسؤولة جزئيا عن المقاومة للأمبينيم أن 74.4% (29/39) من عزلات الزوائف الزنجارية المقاومة للأمبينيم احتوت الجين blaIMP وأن جميع العزلات (0%) لم تحتوي الجين blaVIM.
بينت نتائج فحص تكوين الغشاء الحيوي Biofilm formation لعزلات الزائفة الزنجارية المقاومة للأمبينيمIRPA بطريقة اطباق المعايرة الدقيقة وعند الطول الموجي 660 نانوميتر أن 66.7% من العزلات البكتيرية كونته بدرجات متفاوتة وأن نسبة 56.1% و 10.3% من العزلات البكتيرية قد كونته بدرجة ضعيفة و متوسطة على الترتيب وأن 33.3% من العزلات البكتيرية لم تكونه.
وقد حصلت الطالبة على تقدير (امتياز) لدى مناقشتها محتويات رسالتها و تفاصيل بحثها من قبل لجنة المناقشة المدرجة اسمائهم فيما يأتي:
– أ. د. محمد فرج شذر. (رئيسا)
– أ.م.د. عصام جاسم الخليفاوي. (عضوا)
– أ.م.د. سعاد خليل ابراهيم (عضوا)
– م.د. محمود ابراهيم اسماعيل (عضوا و مشرفا)
MSc. Thesis discussion on Molecular study of imipenem resistant Pseudomonas aeruginosa isolated from different clinical samples
The department of Biology in our college discussed MSc. thesis of student Marawa Lafta Jabur entitled (Molecular study of imipenem resistant Pseudomonas aeruginosa
The discussion committee
Prof.Dr.Mohammed Faraj Shadhar Head
Asst.prof.Dr.Esam Jasim Al-Khlifawi member
Asst.prof.Dr.Sua’ad khalil Ibrahim member
Lect.Dr.Mahmood Ibrahim Ismail supervisor member
The Abstract
In this study, a total of 160 clinical samples included 72 burns samples, 25 wounds samples, 18 sputum samples, 24 urinary tract infections samples and 21 otitis media samples were collected from Baghdad city hospitals, during a period of 4 months from 19/12/2017 to 23/4/2018. The samples were cultured on MacConkey agar plates to isolate Pseudomonas aeruginosa bacteria. The results showed that rate of P. aeruginosa isolates was 65% (104/160) of total clinical samples and imipenem resistant P. aeruginosa (IRPA) rate of P. aeruginosa isolates was 37.5% (39/104).
The results of phenotypic beta lactamases detection showed that all imipenem resistant Pseudomonas aeruginosa isolates(39/39) was not produced extended spectrum betalactamases (0%) using double disk synergy test, while 89.7% (35/39) of IRPA isolates was metallo-beta-lactamases producer using Imipenem-EDTA combined disk test
Result of antibiotic sensitivity test for 11 antibiotics using agar diffusion method showed that was no resistance (o%) in polymyxin B for all IRPA isolates (sensitivity 100%), high levels of resistance for the other antibiotics: cefotaxime and ceftazidime 100%, netilmicin and amikacin 94.3%, meropenem, gentamicin and tobramycin 91.4%, cefepime 88.6%. aztreonam 82.9% and piperacillin/tazobactam77.1 % . The results of minimum inhibitory concentration (MIC) values showed that high rate of resistance was 100% for tigecycline and ceftazdin with MICs values ≤ 64 and ≤ 8 µg/ml respectively
The molecular detection of blaIMPand blaVIMgenesresponsible partial resistance for imipenem antibiotic showed that 74.4% (29/39) of IRPA isolates was contained the blaIMPgene, while the blaVIMgene was not recorded (0%) in all bacterial isolates.
The results of biofilm formation test of IRPA isolates by microtiter plate at wave length630 nm showed that 66.7% of isolates was formed it, 56.1% and 10.3% of bacterial isolates was formed moderate biofilm and weak biofilm respectively, and 33.3% of IRPA isolates was not formed biofilm
The results of urease test of imipenem resistant P. aeruginosa isolates on skim milk agar plates showed that 93.2% (36/39) of the isolates was produced it
The sequencing analysis for 16SrDNA gene (5 IRPA isolates) was done and the results appeared seven mutations included six substitution mutations and one insertion mutation
