مناقشة رسالة ماجستير تبحث في عزل وتشخيص الفطريات من عينات اعلاف ولحوم الاسماك

ناقش قسم علوم الحياة في كلية التربية للعلوم الصرفة (ابن الهيثم) رسالة الماجستير الموسومة (  الكشف عن   (Aflatoxin B1) في اعلاف ولحوم الأسماك العراقية ) للطالبة ( الاء سعد حسن علوان ) التي انجزتها تحت اشراف التدريسية في القسم ( أ.م.د. فادية فلاح حسن).

ونوقشت الرسالة على قاعة المرحوم (أ.د. فهد علي حسين) من قبل اعضاء لجنة المناقشة :

• أ.م.د. ثامرعبد الشهيد محسن       رئيسا

• أ.م.د. محمد حسين مشرف           عضوا

• م.د. مها عبد النبي غثوان              عضوا

• أ.م.د. فادية فلاح حسن                عضوا و مشرفا

وتهدف الدراسة الى :

1. عزل وتشخيص اجناس الفطريات الموجودة في اعلاف الاسماك

2. الكشف عن Aflatoxin B1 في عينات الاسماك واعلافها

3. الكشف عن Ochratoxin A في عينات الاسماك واعلافها

4. انتخاب بعض عينات الاسماك التي تم الكشف عن وجود الـ Aflatoxin B1 فيها لغرض اجراء هذه الدراسة النسيجية المرضية و انتخاب بعض عينات الاسماك التي تم الكشف عن وجود الـ Ochratoxin A  فيها لغرض اجراء هذه الدراسة النسيجية المرضية

5. انتخاب بعض عينات الاسماك التي تم الكشف عن وجود الـ Aflatoxin B1 واجراء دراسة نسيجية مناعية لها باستعمال الواسم المناعي COX-2 و انتخاب بعض عينات الاسماك التي تم الكشف عن وجود الـ Ochratoxin A فيها لاجراء دراسة نسيجية مناعية لها باستعمال الواسم المناعي COX-2 .

       تم اجراء هذهِ الدراسة في كلية التربية للعلوم الصرفة ( ابن الهيثم / جامعة بغداد ) كان الهدف من هذهِ الدراسة هو عزل وتشخيص الفطريات من عينات اعلاف الاسماك والكشف عن الـ Aflatoxin B1  و الـ Ochratoxin A في عضلات الاسماك واعلافها التي تم جمع العينات بشكل عشوائي من بعض مزارع الاسماك  في محافظة بغداد وبابل وواسط والانبار وصلاح الدين ، وتضمنت هذه الدراسة جمع 35  عينة علف و 70 عينة عضلات اسماك ، كل عينتين من السمك تغذت على عينة واحدة من العلف ، وقد بينت نتائج الزرع وجود عدة اجناس من الفطريات المختلفة .

( Aspergillus spp , Mucor spp ,Pencillium  spp ,Yeast spp ,Fussarium spp, Rhizopus spp, Scopilariosis SPP  , Epicoccum spp, Alternaria spp , Cladosporium spp , Botrytis spp , Helminthosporium spp , Trichtheicum spp )

وكان الـ Aspergillus spp هو الاكثر وجوداً في جميع عينات الاعلاف بنسبة 48% ، اما نتائج الكشف عن Aflatoxin B1  فقد اظهرت تلوث (53) عينة من مجموع (70) عينة لعضلات الاسماك وتلوث (34) عينة لأعلاف الاسماك من مجموع (35) عينة ، وتراوحت التراكيز من (ppb 0) الى (310 ppb) للعضلات وتركيز Aflatoxin B1  في الاعلاف من (0 ppb) الى (864ppb) .

اما نتائج الكشف عن Ochratoxin A فقد اظهرت تلوث (17) عينة من عضلات الاسماك من اصل (70)  عينة ، وتلوث (13) عينة علف من أصل (35) عينة من الاعلاف ، وتراوحت قيمة تراكيز Ochratoxin A من (0 ppb) الى (  98 ppb) في عضلات الاسماك ، اما في الاعلاف فتراوحت قيم التراكيز من (0 ppb) الى (573ppb).

واظهرت نتائج الدراسة النسجية المرضية في عضلات الاسماك للـ Aflatoxin B1  بتركيز (310ppb) وجود استبدال دهني الذي يعد من السمات الشائعة للعضلات في المرحلة النهائية

اما في التركيز (ppb 162) فقد ادى الـ Aflatoxin B1 الى تجزء وتمزق الالياف العضلية وتنكس في الانوية المحيطة .

بينما في تركيز (30ppb) فقد اظهرت النتائج  تدهور البلازما العضلية تبدو بلون حامضي شاحب بسبب تدهور الالياف .

وقد بينت نتائج الدراسة النسجية المرضية في عضلات الاسماك للـ Ochratoxin A بتركيز (98ppb)  ظهور تجزء وتمزق في الالياف العضلية وتنكس في الانوية المحيطة .

اما بتركيز (56ppb) فبينت النتائج ان البلازما العضلية تبدو بلون حامضي شاحب ذلك بسبب تدهور الالياف وتجزء وتمزق الالياف العضلية .

لوحظ بتركيز(43ppb)  وجود تجمع معدني في العضلات ، اما في تركيز الـ (0ppb) للـ Aflatoxin B1 والـ Ochratoxin A فلم يظهر أي ضرر نسيجي .

اما نتائج الدراسة النسجية المناعية  للتراكيز نفسها التي استعملت في الدراسة النسجية المرضية باستعمال الواسم المناعي Cox-2 للـ Aflatoxin B1 عند تركيز (310 ppb) فكان هناك تعبيرا مناعيا شديدا (+++) .

كان تركيز الـ (162ppb)  التعبير المناعي (++) ، اما في تركيز الـ (30ppb)  كان التعبير المناعي (+) اما في تركيز(98ppb) للـ Ochratoxin A في العضلات فكان التعبير المناعي (++) .

وبتركيز (56ppb)  فكان التعبير المناعي (+) في حين ان التركيز (43ppb) فكان التعبير المناعي (+) .

اما في تركيز الـ (0ppb)  للـ Aflatoxin B1 و الـ Ochratoxin  A للعينة نفسها  فلم يُظهر أي تفاعل مناعي في النسيج (-) .

وتوصلت الطالبة الى التوصيات الاتية :

1 – القيام بفحص الاعلاف بشكل دوري والتخلص من تلك التي تحوي على السموم

2 – تجنب اضرار الحبوب قدر الامكان قبل واثناء التجفيف وعند التخزين

3 – خزن الاعلاف في امكنة نظيفة ومستوفية لشروط النظافة من حرارة ورطوبة وتهوية

4 – القيام بتعقيم دوري لمخازن الاعلاف

5– بضرورة القيام بحملة توعية من قبل وزارة الصحة ووسائل الاعلام ومنظمات المجتمع المدني تبين مخاطر السموم .

   Detection of Aflatoxin B1 in Iraqi

Fish feeds and meat

By Alaa Saad Hassan

Supervised by Asst.prof.Dr.Fadia Falah Hassan

 Summary

This study was conducted at the College of Education for Pure Sciences (Ibn Al-Haitham)/University of Baghdad. The aim of this study was to isolate and diagnose fungi from fish feed samples, and also detect aflatoxin B1 and ochratoxin A in fish muscles and feeds. Randomly, the samples were collected from some fish farms from Baghdad, Babil, Wasit, Anbar, and Salah al-Din provinces. This study included the collection of 35 feed samples and 70 fish muscle samples, and each of the two fish samples fed on one sample of the feed. The results showed the presence of several genera of different fungi including Aspergillusspp ,Mucorspp., Pencilliumspp., Yeast spp., Fussariumspp.,Rhizopusspp.,Scopilariosisspp.,Epicoccumspp.,Alternariaspp.,Cladosporiumspp., Botrytis spp.,Helminthosporiumspp.andTrichtheicumspp

Aspergillus spp. was the most present in all feed samples by 48%, while the results of the detection of aflatoxin B1 showed a contamination in 53 sample of the total 70 samples of fish muscles, while the contamination was found in 34 samples of fish feed from a total of 35 samples. The concentrations ranged from 0-310 ppb in muscles and aflatoxin B1 concentration in feeds was 0-864 ppb

The results of the detection of ochratoxin A revealed that 17 of fish muscles samples was contaminated with it of the total 70 samples, and contamination 13 feed samples of the total 35 feed samples. The concentration of ochratoxin A  was 0-98 ppb in fish muscles, while in feeds it was 0-573 ppb

The histopathological study in the fish muscles contaminated with Aflatoxin B1 at concentration (310 ppb) showed a lipid replacement which is a common feature of the muscles in the final stage.While in concentrations (162 ppb), Aflatoxin B1 resulted in the fracturing of muscular fibers and degeneration in the surrounding nuclei. Moreover, at concentration (30 ppb) it has showed the degeneration of muscular plasma appears to be pale in acidic color due to fiber degradation

The histopathological study in fish muscles showed that the concentration of Ochratoxin A at 98ppb caused a fracture in muscular fibers and degeneration in surrounding nuclei. While at the concentration (56ppb) showed that muscular plasma appears pale in acid color due to degradation and fragmentation of muscular fiber. At concentration 43 ppb, a metallic aggregation was observed, while at 0ppb concentration of Aflatoxin B1 and Ochratoxin A, no tissue damage was observed

The results of the immunohistochemistry study of the same concentrations that were used in the histopathological study using the immunoassay marker COX-2 for the concentration of Aflatoxin B1 at (310 ppb) concentration, it was found high immunological expression (+++). While at concentration 162 ppb, the immunological expression was (++), and was (+) at concentration 30 ppb. The expression for Ochratoxin A at concentration 98 ppb was (++) and was (+) at concentration 56 ppb in the muscles

At the 0ppb concentration of Aflatoxin B1 and Ochratoxin A, no immune reaction was detected in the tissue (-)