ناقش قسم الكيمياء في كلية التربية للعلوم الصرفة (ابن الهيثم) رسالة الماجستير الموسومة (تطوير طريقة القياس الطيفي للتقدير الكمي للهيدروكلوروثيازايد وتطبيقاتها ) للطالبة (هيام كريم نور محمد) التي انجزتها تحت اشراف ( أ.م.د. سمية محمد عباس) ونوقشت من قبل أعضاء لجنة المناقشة المبينة أسمائهم فيما يأتي :
- أ.م.د. أكثم نصيف جاسم ( رئيسا )
- أ.م.د. سعاد سلمان محمد ( عضوا )
- م.د. همسه منعم ياسين (عضوا )
- أ.م.د. سمية محمد عباس ( عضوا ومشرفا)
وتهدف الدراسة الى إيجاد طريقة طيفية سريعة وغير مكلفة وجديدة لتقدير عقار الهيدروكلوروثيازايد بصيغته النقية وفي المستحضرات الصيدلانية بوساطة:
.1 تقدير طيفي غير مباشر عن طريق اقتراح تفاعل ازوتة للعقار والاقتران مع اثنين من الكواشف العضوية (Resorcinol , Diphenylamine).
.2 تقدير طيفي غير مباشر عن طريق تفاعلات الاكسدة والاختزال باستعمال العامل المؤكسد N- بروموسكسنيمايد (NBS) وتقدير المتبقي من العامل المؤكسد بوساطة التارتارازين (TART).
تتضمن الدراسة تطوير طريقتين طيفيتين جديدتين لتقدير عقار الهيدروكلوروثيازايد بشكل آني بصيغته النقية وفي مستحضراته الصيدلانية. وتقدير المركبات الدوائية طيفيا بتقنية فوق الاشعة البنفسجية والمرئية.
الطريقة الاولى
تتضمن تقديرا للعقار بطريقة غير مباشرة اعتمادا على التحلل المائي باستخدام حامض الهيدروكلوريك المركز(لمجموعة الامين الثانوية) وتكوين مركبات امينية اولية تمت ازوتتها وتكوين ملح الديازونيوم ومن ثم اقترانهم مع كاشفين مختلفين (الريزورسينول في الوسط القاعدي وكما موضح في الفقرة (a) وثنائي فنيل امين في الوسط الحامضي وكما موضح في الفقرة (b) ) لتكوين صبغة ازو مستقرة , وتم الحصول على النسب المولية للمركب الدوائي المؤزوت مع الكاشفين المقترنين بطريقتين : التغيرات المستمرة والنسب المولية إذ كانت النسبة 1:1 .
اظهرت نتائج تفاعل اقتران كاشف الريزورسينول مع المركب الدوائي المؤزوت للهيدروكلوروثيازايد في وسط قاعدي pH=13 لتكوين صبغة ذات لون برتقالي ذائب في الماء التي يقاس امتصاصها عند الطول الموجي 426=λ max)نانومتر(. تم في الدراسة اتباع اسلوب المتغير الاحادي التقليدي للوصول الى الظروف الفضلى المؤثرة على التفاعل اللوني, ان الخصائص التحليلية والبيانات الاحصائية لمنحنى المعايرة لتقدير الهيدروكلوروثيازيد ان الطريقة المقترحة كانت جيدة اذ بلغت قيمة معامل الامتصاص المولاري 14140.75 لتر/مول.سم وكانت دلالة ساندل =0.0210 مكغم/سم2 واتبعت الطريقة قانون بير في مدى من التراكيز تراوح بين (13.00-0.25) مكغم/مل من العقار مع بلوغ الانحراف القياسي النسبي للطريقة اقل من%3.376 , بينما بلغت دقة الطريقة المعبر عنها بدلالة الخطأ النسبي اقل من2.340 % ولثلاث مستويات من تراكيز العقار وكانت قيمة حد الكشف=0.1174مكغم/مل وقيمة حد الكشف الكمي=0.3557 مكغم/مل. وبعد التأكد من عدم حصول تداخل عند وجود مضافات دوائية شائعة(سواغات) في الطريقة الحالية, تم تطبيق الطريقة بنجاح على المستحضرات الصيدلانية الحاوية على الهيدروكلوروثيازيد بالطريقتين المباشرة والاضافات القياسية , والحصول على قيم استردادية تتراوح بين (101.16-100.40)%.
b– اظهرت نتائج تفاعل اقتران كاشف ثنائي فنيل امين مع المركب الدوائي المؤزوت للهيدروكلوروثيازايد في وسط حامضي لتكوين صبغة ذات لون بنفسجي ذائبة في الماء التي يقاس امتصاصها عند الطول الموجي 516=λ max) نانومتر(. تم في الدراسة اتباع اسلوب المتغير الاحادي التقليدي للوصول الى الظروف الفضلى المؤثرة على التفاعل اللوني , ان الخصائص التحليلية والبيانات الاحصائية لمنحنى المعايرة لتقدير الهيدروكلوروثيازيد ان الطريقة المقترحة كانت جيدة اذ بلغت قيمة معامل الامتصاص المولاري9109.62 لتر/مول.سم وكانت دلالة ساندل =0.0327 مكغم/سم2 واتبعت الطريقة قانون بير في مدى من التراكيز تراوح بين (22.50-0.75) مكغم/مل من العقار مع بلوغ الانحراف القياسي النسبي للطريقة اقل من%0.667 , بينما بلغت دقة الطريقة المعبر عنها بدلالة الخطأ النسبي اقل من 1.160% ولثلاث مستويات من تراكيز العقار وكانت قيمة حد الكشف= 0.1521 مكغم/مل وقيمة حد الكشف الكمي= 0.4607 مكغم/مل. وبعد التأكد من عدم حصول تداخل عند وجود مضافات دوائية شائعة (سواغات) في الطريقة الحالية , تم تطبيق الطريقة بنجاح على المستحضرات الصيدلانية الحاوية على الهيدروكلوروثيازيد بالطريقتين المباشرة والاضافة القياسية , والحصول على قيم استردادية تتراوح بين (99.24 – 91.80)%.
الطريقة الثانية
تضمنت تقديرا للعقار بطريقة غير مباشرة اعتمادا على تفاعلات الاكسدة والاختزال . اعتمدت الطريقة على مفاعلة الهيدروكلوروثيازيد مع زيادة محسوبة من ال N- بروموسكسنيمايد في الوسط الحامضي وتعيين الفائض من الكاشف المؤكسد وذلك بقياس امتصاص المتبقي من صبغة التارتارازين بعد قصره بوساطة العامل المؤكسد الفائض عن أكسدة المركب الدوائي عند الطول الموجي426=λ max) نانومتر( في الوسط الحامضي عند تقديره. وقد تم في الدراسة اتباع اسلوب المتغير الاحادي التقليدي للوصول الى الظروف الفضلى المؤثرة على تفاعل الاكسدة, واظهرت النتائج ان الخصائص التحليلية والبيانات الاحصائية لمنحنى المعايرة لتقدير العقار ان الطريقة المقترحة كانت جيدة اذ بلغت قيمة معامل الامتصاص المولاري 89458.85 لتر/مول.سم وكانت دلالة ساندل =0.0034 مكغم/سم2 واتبعت الطريقة قانون بير في مدى من التراكيز تراوح بين (1.0-0.1) مكغم/مل من العقار مع بلوغ الانحراف القياسي النسبي للطريقة اقل من%1.449 , بينما بلغت دقة الطريقة المعبر عنها بدلالة الخطأ النسبي اقل من 4.350% ولثلاث مستويات من تراكيز العقار وكانت قيمة حد الكشف= 0.0597 مكغم/مل وقيمة حد الكشف الكمي= 0.1810 مكغم/مل. وبعد التأكد من عدم حصول تداخل عند وجود مضافات دوائية شائعة (سواغات) في الطريقة الحالية , طبقت الطريقة وبنجاح على المستحضرات الصيدلانية الحاوية على الهيدروكلوروثيازيد بالطريقتين المباشرة والاضافة القياسية والحصول على قيم الاستردادية تتراوح بين (98.50-92.50)%.
وخلصت الطالبة الى التوصيات الاتية :
1 استعمال كواشف اخرى غير الكاشفين الريزورسينول و ثنائي فنيل امين يمكن ان يدخل تفاعل اقتران مع عقار الهيدروكلوروثيازيد بعد ازوتت العقار او الكاشف والاستفادة من ذلك في ايجاد طريقة طيفية جديدة.
.2 تقدير العقار قيد الدراسة بطرائق طيفية اخرى.
.3 البحث في تقدير عقاقير طبية اخرى بالتفاعل مع الكواشف نفسها.
.4 استعمال التقدير الطيفي بتفاعل الازوتة والاقتران وتفاعل الاكسدة لتقدير عقاقير طبية اخرى والتوسع في استعمال هذه التقنية.
.5 إمكانية دراسة ناتج التحلل للعقار مع المركب غير المتحلل بطريقة التقدير الطيفي الآني بواسطة مطيافية المشتقة.
Development of a Spectrophotometric Method for the quantitation of hydrochlorothiazide and its application
By Hiyam Kareem Noor Mohammed Al –Sharify
Supervised by Asst.prof.Dr.Summaya Muhammed Abbas
The Aim of the Study
The study aims to find a fast, inexpensive and new spectrophotometric method for the determination of hydrochlorothiazide in its pure form and in pharmaceutical preparations by means of:
. Indirect spectrophotometric determination by suggesting an oxidation reaction of the drug and coupling with two organic reagents (Resorcinol and Diphenylamine).
. Indirect spectrophotometric determination by oxidation-reduction reactions using the oxidizing agent N Pro and musuccinimide (NBS) and the determination of the residual oxidizing agent mediated by tarazine (TART.
Summary
This study includes the development of two new spectroscopic methods for the determination of hydrochlorothiazide both in its pure form and in its pharmaceutical preparations. and then spectrophotometry estimation of the drug compounds using ultraviolet and visible rays.
The first method: Includes an indirect estimation of the drug depending on hydrolysis of this drug using concentrated hydrochloric acid ( for secondary amine group) and formation of primary amino compounds a diazonium salt and then coupling with two different reagents (Resorcinol in the basic medium as shown in paragraph (a) and Diphenyl-amine in the acidic medium as described in paragraph (b)) to form a stable azo dyes , the stoichiometric study of the hydrolysis drug compound were obtained with two coupling reagents by: continuous changes and molar ratios methods ,as the ratio was 1:1
The reaction results of the coupling resorcinol reagent with the azotization drug (hydrochlorothiazide) in basic medium of pH = 13 were shown to form a dye of orange color dissolved in water whose maximum absorption is measured at the wavelength (λmax= 426 nm). In this study, the single variable was followed to reach the best conditions affecting developed color intensity. That analytical properties and statistical data of the calibration curve to estimate hydrochlorothiazide in the proposed method was good as the value of the molar absorption coefficient 14140.75 L/mol. cm and the sensitivity of Sandell was 0.0210 µg/cm2 and the method followed Beer’s law in a range of concentrations between (0.25-13.00) µg/ml of the drug with the relative standard deviation of the method being less than 3.376%, while the accuracy of the method being less than relative error 2.340% for three levels of drug concentrations. the value of the limit of detection was 0.1174 µg/ml and the limit value of quantitative detection equal to 0.3557 µg/ml . After making sure that there was no interference in the presence of common drug additives (excipients) in the current method, the method was successfully applied to pharmaceutical preparations containing hydrochlorothiazide by both direct methods and standard additives, And obtaining recovery values ranging from (100.40 – 101.16)%.
The reaction results of the coupling Diphenylamine reagent with the azotization drug (hydrochlorothiazide) in acidic medium to form a dye of a violet-color dissolved in water whose maximum absorption is measured at the wavelength (λmax= 516 nm). In this study, the single variable was followed to reach the best conditions affecting developed color intensity. That analytical properties and statistical data of the calibration curve to estimate hydrochlorothiazide in the proposed method was good as the value of the molar absorption coefficient 9109.62 L/mol. cm and the sensitivity of Sandell was 0.0327 µg/cm2 and the method followed Beer’s law in a range of concentrations between (0.75-22.50) µg/ml of the drug with the relative standard deviation of the method being less than 0.667%, while the accuracy of the method expressed in terms of the relative error less than 1.160% for three levels of drug concentrations. the value of the limit of detection was 0.1521 µg/ml and the limit value of quantitative detection = 0.4607 µg/ml After making sure that there was no interference in the presence of common drug additives (excipients) in the current method, the method was successfully applied to pharmaceutical preparations containing hydrochlorothiazide by both direct methods and standard additives, And obtaining recovery values ranging from (91.80- 99.24)%.
The second method: Included an indirect estimation of the drug based on oxidation and reduction reactions, the method relied on the hydrochlorothiazide reaction with a increase of N-bromosuxinimide in the acidic medium and the determination of the excess of the oxidative reagent by measuring the absorption of the residual of tartarazine, after being oxides by the excess oxidant from the oxidation of the medicinal compound at the wavelength (λmax 426 nm) in the acid medium. In this study, the single variable was followed to reach the best conditions affecting developed color intensity. That analytical properties and statistical data of the calibration curve to estimate hydrochlorothiazide in the proposed method was good of the molar absorption coefficient was 89458.85 L/mol.cm and the sensitivity of Sandell was 0.0032 µg/cm2, and the method followed Beer’s law in a range of concentrations between (0.1-1.0) µg/ml of the drug with the relative standard deviation of the method being less than 1.449%, while the accuracy of the method expressed in terms of the relative error less than 4.350% for three levels of drug concentrations. the value of the limit of detection was 0.0597 µg/ml and the value of quantitative detection limit 0.1810 µg/ml. after making sure that there is no interference with common drug additives (excipients) in the current method, apply the method successfully to pharmaceutical preparations containing hydrochlorothiazide by the direct and standard methods and obtain recovery values ranging between (92.50 – 98.50) %.
-
Recommendations
