ناقش قسم علوم الحياة في كلية التربية للعلوم الصرفة – ابن الهيثم ، أطروحة الدكتوراه الموسومة ” تقييم بعض المعلمات المناعية والوراثية في مرضى عراقيين بالذئب الاحمراري ” للطالبة ” أنوار خليل إسماعيل ” التي انجزتها باشراف التدريسية في القسم ” أ.د. حازمة موسى خليل ” ونوقشت من قبل أعضاء لجنة المناقشة المبينة أسمائهم في ما يأتي :
أ.د. إحسان عرفان حسين – رئيساً
أ.د. هنادي سالم عبد الصاحب – عضواً
أ.د. عبد النبي جويد عبد – عضواً
أ.م.د. سحر سعدي غريب – عضواً
أ.م.د. حنان ياسين محسن – عضواً
أ.د. حازمة موسى خليل – عضواً ومشرفاً
وهدفت الاطروحة إلى دراسة دور بعض معدلات العظم (RANKL وSclerostin)، والعوامل المناعية (PD-1 وNFATc1) وبعض العناصر النزرة (الزنك، النحاس، الألومنيوم) بالإضافة إلى عنصر الكالسيوم الأساسي ودورها في التسبب بداء الذئب الاحمراري. ولتحقيق ذلك تم اعتماد العديد من الأساليب:
1- تقييم مستويات الأجسام المضادة الذاتية (ANA & anti-dsDNA) في الدم باستخدام تقنية ELISA.
2- تقدير مستويات الـ RANKL و Sclerostin في مصل النساء المصابات والسيطرة باستخدام تقنية ELISA.
3- تقدير مستويات فيتامين D3 و PD-1 في مصل النساء المصابات والسيطرة باستخدام تقنية الاليزا.
4- تقدير مستوى التعبير الجيني لجينات PDCD1 وNFATc1 باستخدام تقنية Real time-qPCR.
5- تقدير مستويات العناصر النزرة Zn وCu وAl والعناصر الأساسي Ca باستخدام تقنية مطياف الامتصاص الذري.
6- دراسة علاقة العلاج (Prednisone + hydroxychloroquine + vitamin D3) وتأثيره على المعلمات المقاسة.
هدفت الدراسة الحالية الى تقييم بعض معدلات العظم وبعض الجوانب المناعية والبايوكيميائية ودورها في إمراضية داء الذئب الاحمراري في عينة من النساء العراقيات المصابات بداء الذئب الأحمراري. تضمنت الدراسة الحالية مائة وثمانون أنثى، تراوحت أعمارهن من 20–40 عاماً واللاتي قُسمن الى ثلاثة مجاميع، المجموعة الأولى (G1) تكونت من 60 امرأة مصابة بداء الذئبة الحمراء في بداية تشخيصهن بالمرض غير معالجات، والمجموعة الثانية ((G2 تكونت من 60 امرأة مصابة بداء الذئبة الحمراء يتلقين العلاج ومثلت المجموعة الثالثة (G3)60 امرأة من الأصحاء كمجموعة سيطرة. تم جمع العينات في مستشفى مدينة الطب ومستشفى اليرموك التعليمي في مدينة بغداد خلال الفترة الممتدة من آذار 2022 حتى آب 2022. سُحب الدم الوريدي لتقدير المستويات المصلية لمنشط مستقبل العامل النووي كابا- بي RANKL، السكلروستين Sclerostin، بروتين موت الخلايا المبرمج PD-1 وفيتامين D3 Vitamin D3 بتقنية المقايسة الإمتصاصية المناعية للأنزيم المرتبط ELISA، ودراسة التعبير الجيني لجين موت الخلايا المبرمج PDCD1 والعامل النووي للخلايا التائية المنشطة NFATc1بتقنية تفاعل البوليمريز المتسلسل بالزمن الحقيقي Real time-qPCR، فضلاً عن تقدير مستويات بعض العناصر النزرة وهي الزنك ((Zn، النحاس ((Cu والألمنيوم (Al) والعنصر الأساسي الكالسيوم ((Ca بإستخدام تقنية مطيافية الامتصاص الذري AAS.
لم تُظهر نتائج الدراسة الحالية وجود فروق معنوية حسب العمر بين المجاميع الثلاث المدروسة.
أظهرت نتائج الدراسة الحالية أن مستوى ANA زاد معنوياً (P≤0.05) في مجموعتي المرضى (G1 وG2) مقارنة مع مجموعة السيطرة G3، حيث كانت النتائج ((3.13±0.26، (2.37±0.24) و((0.504±0.05 U/ml على التوالي. كذلك ارتفع مستوى anti-dsDNA بشكل ملحوظ في مجموعتي المرضى (G1 وG2) مقارنة مع مجموعة السيطرة G3، حيث كانت النتائج ((75.85±7.67، (59.72±8.35) و(22.12±1.35) ng/ml، على التوالي. إضافة إلى ذلك، أظهرت النتائج وجود ارتفاع معنوي في مستوى فيتامين D3 في مجموعتي المرضى (G1 وG2) مقارنة مع مجموعة السيطرة G3، حيث كانت النتائج ((56.87±4.45، (56.62±2.08) و(46.02±1.57) ng/ml، على التوالي. كان مستوى PD-1 مرتفعاً أيضاً في مجموعتي المرضى (G1 وG2) مقارنة مع مجموعة السيطرة G3، كانت النتائج ((0.611±0.04، (0.579±0.07) و(0.256±0.04) ng/ml، على التوالي.
أظهرت نتائج مستويات مصل RANKL عدم وجود فروق معنوية (P≤0.05) بين المجاميع الثلاث المدروسةG2 ،G1 وG3، حيث كانت النتائج ((1.203±0.29، (0.921±0.28) و(0.870±0.23) pg/ml، على التوالي. كذلك لم تسجل مستويات Sclerostin فروقاً معنوية بين المجاميع الثلاث المدروسة G1، G2 وG3، ((0.686±0.09، (0.588±0.09) و(0.462±0.08 ) ng/ml، على التوالي.
أما عن نتائج التعبير الجيني ، بينت النتائج ارتفاع معنوي (P≤0.05) في مستويات التعبير الجيني PDCD1 حيث كانت التراكيز الأعلى في مجموعة المعالجين G2 (59.74±33.26 folds) تلتها مجموعة التشخيص المبكر G1 (23.18±10.17 folds) ، ثم مجموعة السيطرة (3.46±1.93) G3. إضافة إلى ذلك، بينت النتائج ارتفاع معنوي في مستويات التعبير الجيني لبروتين NFATc1 حيث كانت التراكيز الأعلى في مجموعة المعالجين G3 (0.17±0.16) تلتها مجموعة التشخيص المبكر G1 (0.003±0.002) ثم مجموعة السيطرة G3 (0.001±0.0007).
بينت نتائج Zn، Cu، Al وCa أن مستويات Zn وCa انخفضت بشكل ملحوظ في مجموعتي المرضى G1 و G2 مقارنة بمجموعة السيطرة G3، حيث كانت النتائج (7.65±0.09, 72.91±1.22) و(7.71±0.12, 72.86±1.31) mg/dl على التوالي، بينما مجموعة G3 سجلت ( 100.2±2.36و(9.22±0.07 mg/dl على التوالي. في حين سجلت نتائج النحاس والألمنيوم ارتفاعا معنوياً في مجموعتي المرضى G1 و G2 (146.91±1.93, (10.87±0.3 و (11.15±0.27, 148.5±1.65) على التوالي، مقارنة بمجموعة السيطرة G3 mg/dl (6.97±0.21, 105.51±2.27)،على التوالي.
لم تسجل نتائج تأثير العلاج على العوامل المدروسة فروقًا ذات دلالة إحصائية (P≤0.05) في جميع مستويات العوامل في كلتا المجموعتين (مجموعة المرضى المعالجين الذين يتلقون فيتامين 3D ومجموعة المرضى المعالجين الذين لا يتلقون فيتامين (D3. باستثناء RANKL الذي سجل فروقاً معنوية.
أظهرت نتائج معامل الارتباط بيرسون لـANA Anti-dsDNA PD-1, RANKL, وSclerostin عدم وجود ارتباط فيما بينها، ما عدا (ANA, anti-dsDNA) التي أظهرت ارتباط طردي ضعيف فيما بينهما. علاوة على ذلك، أظهر Cu و Al ارتباط عكسي متوسط مع Zn وارتباط عكسي ضعيف مع Ca، بينما أظهرا Zn وCa ارتباط طردي متوسط فيما بينهما.
بينت نتائج الدراسة الحالية أن PD-1 وNFATc1 تعتبر أهدافاً علاجية جيدة لداء الذئب الاحمراري وأن مستويات RANKL وSclerostin في المصل لا تعكس مستوياتها في العظام، وأن العناصر Zn وCu وAl وCa تلعب دوراً في إمراضية داء الذئب الاحمراري.
وخلصت الاطروحة الى التوصيات الاتية :
1- تحديد المستوى المصلي لفيتامينات أخرى مثل فيتامين C وفيتامين K.
2- تقدير التعبير الجيني لمستويات RANKL وSclerostin باستخدام تقنية RT-qPCR
3- تقديرالمستويات المصلية لمعدلات العظام الأخرى مثل osteoprotegerin و Dickkopf 1.
4- تقييم كثافة المعادن في العظام باستخدام جهاز قياس امتصاص الأشعة السينية ثنائي الطاقة (DXA).
5- دراسة المستويات المصلية للعناصر النزرة الأخرى مثل الكادميوم والسيلينيوم والمغنيسيوم.
6- تقدير مستوى الكولاجين في الدم بتقنية الإليزا.
7- دراسة التعبير الجيني والتنميط الجيني لجين TLR-7.
8- تقدير الهرمونات الجنسية مثل هرمون الاستروجين.
9- دراسة شدة ونشاط مرض الذئب الاحمراري.
